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無(wú)菌室建設(shè)的無(wú)菌測(cè)試

2020-07-22 15:08:45


微生物檢測(cè)人員天天都需要在無(wú)菌室工作,在超凈臺(tái)或者生物安全柜里操作,為了保證我們檢測(cè)的準(zhǔn)確性,我們必須要求無(wú)菌室以及工作臺(tái)符合要求,那我們應(yīng)該怎樣進(jìn)行驗(yàn)證呢?下面給您介紹一下環(huán)境中無(wú)菌或殺菌效果應(yīng)如何檢查。  

 

一、紫外燈殺菌效果檢查  紫外燈在使用過(guò)程中輻射強(qiáng)度會(huì)逐漸降低,影響其殺菌效果,故應(yīng)該定期檢查。紫外燈的殺菌有效波長(zhǎng)是253.7nm,其強(qiáng)度可以用中心波長(zhǎng)254nm的紫外線強(qiáng)度計(jì)測(cè)定。在沒(méi)有紫外線強(qiáng)度計(jì)的情況下可以采用生物學(xué)替代。 

 

生物學(xué)測(cè)試簡(jiǎn)要步驟如下:


選用枯草芽孢桿菌ATCC 9372,制成106CFU/mL~108CFU/mL濃度的菌懸液;選用經(jīng)脫脂處理的0.5cm×1.0cm大小的布片或鋁片,高壓滅菌后用作載體;每個(gè)載體上滴一滴制備好的菌懸液,干燥后備用;將8個(gè)染菌載體放于無(wú)菌器皿中,置于紫外燈下1m~1.5m處,開(kāi)啟紫外燈照射,于0.5h、1h1.5h2h各取出2個(gè)染菌載體,分別投入盛有5mL緩沖蛋白胨水的洗脫液;系列稀釋后進(jìn)行平板計(jì)數(shù);同法取8個(gè)染菌載體用做陽(yáng)性對(duì)照,操作除不經(jīng)紫外此昂照射外與試驗(yàn)組相同。殺滅率=(陽(yáng)性對(duì)照回收菌數(shù)-試驗(yàn)組回收菌數(shù))/陽(yáng)性對(duì)照回收菌數(shù)×100%  殺滅率大于99.9%時(shí),認(rèn)為紫外燈殺菌效果合格。  


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